Trong trường hợp đặt bước sóng kép, ánh sáng của các chất giao thoa nói chung có hiện tượng tán xạ ánh sáng và hấp thụ ánh sáng không đặc trưng, do đó cần đặt bước sóng chính và bước sóng phụ, bước sóng chính là đỉnh hấp thụ đặc trưng của chất cần kiểm tra. Nguyên tắc thiết lập bước sóng phụ là độ hấp thụ của các chất gây nhiễu ở bước sóng chính càng gần với độ hấp thụ của bước sóng phụ càng tốt. Cùng một đỉnh hấp thụ, vì vậy nó có thể loại bỏ sự can thiệp của hemoglobin. Do đó, bước sóng chính và bước sóng thứ cấp của nhiễu càng gần nhau thì càng tốt.
Yêu cầu đo lường
1. Mẫu: huyết thanh, nước tiểu, dịch não tủy, v.v.
2. Thuốc thử: thuốc thử đơn, thuốc thử kép
3. Bước sóng kép: hai bước sóng bao gồm bước sóng chính và bước sóng phụ. Sự can thiệp trong quá trình phát hiện có thể được loại bỏ.
4. Calibrator (chuẩn): So sánh nồng độ của các mẫu chưa biết
5. Vật liệu kiểm tra chất lượng: được sử dụng để theo dõi tình trạng của dụng cụ, thuốc thử, vv trong công việc hàng ngày của dụng cụ sinh hóa.
phương pháp
1. Phương pháp điểm cuối (endessay) được chuyển hoàn toàn thành sản phẩm, và phản ứng không còn được thực hiện nữa để đạt đến điểm kết thúc, và độ hấp thụ của điểm kết thúc phản ứng được lấy để tính nồng độ của chất thử. Trong các xét nghiệm sinh hóa, ngoại trừ các enzym, BUN và CRE, các phương pháp điểm cuối được sử dụng để phát hiện.
1). Phương pháp một điểm kết thúc: lấy độ hấp thụ của một điểm khi phản ứng đạt điểm kết thúc để tính kết quả.
2). Phương pháp hai điểm cuối: lấy độ hấp thụ của một điểm trước khi phản ứng bắt đầu, sau đó lấy độ hấp thụ của điểm thứ hai khi phản ứng đạt đến điểm kết thúc. Tính kết quả bằng cách trừ độ hấp thụ tại điểm thứ hai trừ đi độ hấp thụ tại điểm đầu tiên. Chủ yếu được sử dụng để trừ thuốc thử và mẫu trắng. Đảm bảo độ chính xác của kết quả. Thường được sử dụng cho thuốc thử kép.
2. Phương pháp thời gian cố định (phương pháp hai điểm): Là lấy hiệu số giữa hai điểm còn trong phản ứng để tính kết quả. Hai điểm này không phải là điểm bắt đầu và cũng không phải là điểm kết thúc của phản ứng. Chủ yếu được sử dụng để phát hiện một số mục không cụ thể, chẳng hạn như creatinine.
3. Phương pháp theo dõi liên tục (phương pháp động học, phương pháp tốc độ): Khi đo hoạt tính của enzym hoặc các chất chuyển hóa của enzym, giá trị độ hấp thụ (△; A / phút) thay đổi tuyến tính trong đường cong phản ứng liên tục được lấy để tính kết quả. Nó còn được gọi là phản ứng bậc 0 vì độ chênh lệch độ hấp thụ giữa các điểm bằng không trong thời gian phản ứng tuyến tính.
