Năm công nghệ phân loại tế bào máu là một ứng dụng toàn diện của quang học, cơ học, cơ học chất lỏng, máy tính điện tử, sinh học tế bào, miễn dịch học và các ngành khác. Nó cho phép dung dịch đo được chảy qua khu vực đo và phát hiện các đặc tính vật lý và hóa học của từng ô một. Một phương pháp để xác định định lượng nhanh chóng và phân tích các tế bào hoặc tế bào con tốc độ cao. Nó có thể phân tích hàng nghìn ô trong một giây và đo nhiều thông số của ô cùng một lúc. Phương pháp trở kháng cũng được sử dụng trong máy phân tích huyết học năm lớp, được gọi là phương pháp trở kháng dòng chảy.
Trên máy đếm tế bào máu thông thường, tế bào hồng cầu (RBC) và tiểu cầu (PLT) dùng chung một kênh đo và nguyên tắc đo hàm lượng hemoglobin (HGB) giống nhau ở mọi loại và cấp thiết bị. Có một kênh chuyên dụng để đếm và phân loại bạch cầu. Bây giờ chúng tôi sẽ giới thiệu ngắn gọn các phương pháp kỹ thuật và nguyên tắc được sử dụng trong từng hạng mục thử nghiệm trên máy phân tích.
1. Xác định hàm lượng hemoglobin
Việc xác định hàm lượng hemoglobin là thêm chất tan huyết vào máu đã được pha loãng để giải phóng hemoglobin ra khỏi hồng cầu. Chất sau kết hợp với tác nhân tan máu để tạo thành một dẫn xuất hemoglobin, dẫn xuất này đi vào hệ thống xét nghiệm hemoglobin và so sánh nó ở một bước sóng cụ thể (thường là 530-550nm). Sự thay đổi màu sắc và độ hấp thụ tỷ lệ với hàm lượng Hb trong chất lỏng và thiết bị có thể hiển thị nồng độ Hb.
Các dòng máy phân tích máu khác nhau có công thức hỗ trợ tác nhân làm tan máu khác nhau, và các dẫn xuất hemoglobin được tạo thành cũng khác nhau, nhưng hầu hết phổ hấp thụ cực đại đều gần với bước sóng 540nm. Trong những năm gần đây, nhiều máy phân tích cao cấp đã áp dụng phương pháp tán xạ ánh sáng laser để phân tích hemoglobin hồng cầu đơn lẻ nhằm giảm thiểu ảnh hưởng của WBC, chyloemia, bilirubin cao, v.v. lên phép đo màu HBG.
2. Phát hiện hồng cầu và tiểu cầu
Việc phát hiện các tế bào hồng cầu là một phần quan trọng của máy phân tích máu. Trước đây, việc phát hiện hồng cầu chủ yếu sử dụng phương pháp trở kháng để đếm số lượng và thể tích hồng cầu để phân loại ra các tín hiệu có kích thước khác nhau và in ra biểu đồ phân bố thể tích hồng cầu. Tuy nhiên, sự kết hợp giữa quang học và trở kháng điện hiện được sử dụng để thực hiện phân tích ba chiều (3D) về thể tích hồng cầu nhằm thu được kết quả chính xác hơn.
Ví dụ: ADVIA 120 của Bayer sử dụng tán xạ ánh sáng để phát hiện tế bào hồng cầu và sử dụng tán xạ ánh sáng chuyển tiếp góc thấp và tán xạ góc cao hai hệ thống đo để đo 1 hồng cầu cùng một lúc, đồng thời đo thể tích và tổng số một tế bào hồng cầu theo kích thước của năng lượng chuyển đổi ánh sáng góc thấp; Tán xạ ánh sáng góc cao có thể thu được nồng độ hemoglobin đơn lẻ, có thể thu được chính xác MCV (thể tích hồng cầu trung bình), MCH (hàm lượng hemoglobin trung bình), MCHC (nồng độ hemoglobin trung bình) và vẽ biểu đồ phân tán hồng cầu, màu đỏ đơn thể tích tế bào máu và hồng cầu Biểu đồ của hàm lượng Hb bên trong và tính toán các thông số như RWD (chiều rộng phân bố thể tích hồng cầu), HDW (chiều rộng phân bố hemoglobin của hồng cầu).
Do sự khác biệt rõ ràng về thể tích của tiểu cầu và hồng cầu, có thể dễ dàng phân biệt tín hiệu quang điện do hai người đo cùng một lúc với một ngưỡng giới hạn. Do đó, cho đến nay, một hệ thống phân tích phổ biến đã được sử dụng để xét nghiệm tiểu cầu và hồng cầu trong phân tích máu toàn phần. Tuy nhiên, các tín hiệu đo lường của tiểu cầu và hồng cầu thường giao nhau. Ví dụ, tín hiệu xung của các tiểu cầu lớn có thể bị nhầm với các tế bào hồng cầu và được đếm, và tín hiệu xung của các tế bào hồng cầu nhỏ có thể đi vào kênh tiểu cầu, gây ra sai số thí nghiệm. Các nhà sản xuất máy phân tích huyết học khác nhau sử dụng nhiều công nghệ tiên tiến khác nhau để giảm sự can thiệp của số lượng tiểu cầu, chẳng hạn như công nghệ dòng quét.
Công nghệ dòng quét (dòng quét): Do tiểu cầu và hồng cầu được đếm trong cùng một ô đếm nên hồng cầu có kích thước lớn sẽ tạo thành xung lớn khi đi qua vùng cảm ứng đếm trung tâm. Nếu có dòng chảy ngược, nó cũng sẽ tạo ra sự xâm nhập trở lại do dòng điện xoáy. Xung nhỏ được hình thành ở rìa của vùng cảm ứng làm cho điện cực có thể cảm nhận được một xung nhỏ tương đương với kích thước của tiểu cầu, điều này sẽ làm tăng sai số lượng tiểu cầu. Công nghệ dòng chảy quét là đếm đồng thời hồng cầu và tiểu cầu, có một dòng chất lỏng ổn định phía sau lỗ đếm hồng cầu, nhờ đó có thể rửa trôi hồng cầu ngay lập tức không cho quay trở lại vùng cảm ứng được. được tính là tiểu cầu.
