ELISA Microplate Reader là gì?
Đầu đọc vi tấm, nghĩa là, xét nghiệm chất hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym, là một công cụ đặc biệt để xét nghiệm chất hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym. Trên thực tế, nó là một máy so màu quang điện hay máy quang phổ ngụy trang đặc biệt, và nguyên lý hoạt động cơ bản của nó về cơ bản giống với cấu tạo chính và máy so màu quang điện. Đơn giản có thể chia nó thành hai loại là bán tự động và hoàn toàn tự động, tuy nhiên nguyên lý hoạt động của chúng về cơ bản là giống nhau. Cốt lõi của nó là máy đo màu, tức là phương pháp so màu được sử dụng để phân tích hàm lượng kháng nguyên hoặc kháng thể. Việc xác định ELISA thường yêu cầu thể tích cuối cùng của dung dịch thử nghiệm phải nhỏ hơn 250μL và không thể hoàn thành thử nghiệm bằng máy so màu quang điện chung, do đó, có các yêu cầu đặc biệt đối với máy so màu quang điện trong đầu đọc vi tấm.
Nguyên tắc
Đầu đọc vi tấm thực chất là một máy so màu quang điện hoặc máy quang phổ ngụy trang mục đích đặc biệt, và nguyên lý hoạt động cơ bản của nó về cơ bản giống với cấu trúc chính và máy đo màu quang điện. Hình bên cho thấy hoạt động của đầu đọc vi tấm lấy mẫu tự động một kênh. Sơ đồ. Sóng ánh sáng phát ra từ đèn nguồn sáng được chuyển thành ánh sáng đơn sắc bởi bộ lọc hoặc bộ đơn sắc, và đi vào mẫu cần thử nghiệm trong cực vi xốp bằng nhựa. Một phần ánh sáng đơn sắc được mẫu vật hấp thụ, phần còn lại được truyền qua mẫu vật Được chiếu sáng tới bộ tách sóng, bộ tách sóng sẽ chuyển đổi các tín hiệu ánh sáng khác nhau của mẫu cần kiểm tra thành các tín hiệu điện tương ứng. Các tín hiệu điện được xử lý bằng tiền khuếch đại, khuếch đại logarit và chuyển đổi tương tự sang kỹ thuật số. Nhập bộ vi xử lý để xử lý và tính toán dữ liệu, cuối cùng là hiển thị kết quả bằng màn hình và máy in. Bộ vi xử lý cũng điều khiển chuyển động của cơ cấu truyền động cơ học theo hướng X và hướng Y để di chuyển tấm vi qua mạch điều khiển, để thực hiện quá trình phát hiện lấy mẫu tự động. Các đầu đọc vi tấm khác sử dụng chuyển động thủ công của tấm vi để phát hiện, do đó, cơ cấu truyền động cơ học và mạch điều khiển theo hướng X và Y được bỏ qua, do đó thiết bị nhỏ hơn và cấu trúc đơn giản hơn.
Microplate là một tấm nhựa trong suốt đặc biệt được sử dụng để đặt mẫu cần thử nghiệm. Mảng có nhiều hàng lỗ nhỏ có kích thước đồng nhất và kháng nguyên hoặc kháng thể tương ứng được nhúng vào trong lỗ. Mỗi lỗ nhỏ có thể chứa vài chục ml dung dịch.
Ánh sáng là sóng điện từ. Bước sóng 100nm-400nm được gọi là ánh sáng tử ngoại, ánh sáng từ 400nm đến 780nm mắt người có thể quan sát được, và bước sóng lớn hơn 780nm được gọi là ánh sáng hồng ngoại. Con người chỉ có thể nhìn thấy màu sắc do ánh sáng chiếu vào vật thể và bị vật thể phản xạ trở lại. Cây xanh có màu xanh lục vì phần lớn cây hấp thụ ánh sáng đỏ cam và ánh sáng xanh tím, nhưng chúng không hấp thụ và phản xạ lại màu xanh lục nên cây có màu xanh lục. Nguyên tắc của phép đo bộ đọc vi tấm là phát hiện độ hấp thụ của chất phân tích ở một bước sóng cụ thể.
Kết cấu
Có đĩa 40 giếng, đĩa 55 giếng, đĩa 96 giếng, v.v. Các dụng cụ khác nhau sử dụng các tấm lỗ khác nhau, có thể được kiểm tra từng tấm hoặc từng hàng.
Ánh sáng đơn sắc được sử dụng bởi đầu đọc vi tấm có thể thu được qua một bộ lọc kết hợp hoặc cùng một bộ đơn sắc như một máy quang phổ. Khi sử dụng bộ lọc như một thiết bị lọc, nó cũng giống như một máy đo màu thông thường. Nó có thể được đặt ở phía trước của tấm vi hoặc sau tấm vi. Sau khi bình ngưng tụ, màng ngăn đến tấm phản xạ, nó được phản xạ bởi tấm phản xạ ở góc 90 ° và đi qua dung dịch so màu theo phương thẳng đứng, sau đó được đưa qua bộ lọc. Đối với tế bào quang điện.
Từ sơ đồ khối làm việc và sơ đồ đường đi ánh sáng của đầu đọc vi tấm, có thể thấy rằng nó có những điểm khác biệt sau đây với các máy so màu quang điện thông thường:
(L) Vật chứa dung dịch so màu cần thử nghiệm không còn sử dụng cuvet nữa mà sử dụng một tấm vi nhựa. Microlate thường được làm bằng vật liệu polyetylen trong suốt, có tác dụng hấp phụ kháng nguyên và kháng thể mạnh nên được sử dụng Nó hoạt động như một chất mang pha rắn.
⑵ Vì tấm vi nhựa chứa mẫu là xốp có nhiều dãy, ánh sáng chỉ có thể truyền theo phương thẳng đứng, do đó chùm ánh sáng của bộ đọc vi tấm truyền qua dung dịch cần thử nghiệm và tấm vi theo phương thẳng đứng. Chùm sáng có thể đi từ trên xuống hoặc có thể đi xuyên qua chất lỏng so màu từ dưới lên trên.
⑶ Các đầu đọc tấm mica thường không chỉ sử dụng A mà đôi khi còn sử dụng mật độ quang OD để thể hiện độ hấp thụ. Đầu đọc microplate có thể được chia thành hai loại: đơn kênh và đa kênh, và đơn kênh được chia thành hai loại: tự động và thủ công. Loại thiết bị tự động Có một cơ chế truyền động cơ học theo hướng X và Y, có thể đưa lần lượt các lỗ nhỏ của tấm kính nhỏ L xuống dưới chùm tia để thử nghiệm và loại thủ công sử dụng chuyển động thủ công của tấm kính để đo.
Trên cơ sở đầu đọc vi tấm đơn kênh, một đầu đọc vi tấm đa kênh đã được phát triển. Loại đầu đọc vi tấm này thường tự động. Nó không có nhiều chùm tia và nhiều bộ tách sóng quang, chẳng hạn như một thiết bị 12 kênh với 12 chùm tia hoặc 12 nguồn sáng, 12 bộ phát hiện và 12 bộ khuếch đại, dưới tác động của thiết bị truyền động cơ học theo hướng X, 12 mẫu được phát hiện trong một chèo thuyền. Tốc độ phát hiện của đầu đọc vi tấm đa kênh nhanh, nhưng cấu trúc của nó phức tạp hơn Giá cũng cao hơn.
Phạm vi ứng dụng của đầu đọc vi tấm
Xét nghiệm huyết học Xét nghiệm kháng thể liên quan đến tiểu cầu PAIgA, PAIgG, PAIgM
Xác định D-Dimer D-Dimer
Xác định các sản phẩm phân giải fibrin trong huyết thanh FDP
Xác định T3, T4 bằng triiodothyronine và tetraiodothyronine
Xét nghiệm miễn dịch Xác định protein phản ứng C CRP
Xác định immunoglobulin IgD, IgE
Xác định các phức hợp miễn dịch lưu hành CIC
Xác định yếu tố dạng thấp IgG, IgA, IgM RF
Kháng thể kháng thyroglobulin, xác định kháng thể microomal TG, TM
Phát hiện miễn dịch ung thư khối u Xác định alpha-fetoprotein AFP
Xác định kháng nguyên carcinoembryonic CEA
Xác định PSA kháng nguyên đặc hiệu của tuyến tiền liệt
Xác định ung thư tuyến tụy, ung thư đường mật, ung thư dạ dày CA19-9
Xác định ung thư buồng trứng CA125
Xác định ung thư vú CA15-3
Xác định ung thư biểu mô tế bào vảy cổ tử cung SCC
Phát hiện ung thư đa tủy xương
Xác định hTG ung thư tuyến giáp
Xét nghiệm miễn dịch bệnh truyền nhiễm, xét nghiệm huyết thanh viêm gan A, kháng HAV-IgM
Xét nghiệm huyết thanh viêm gan B Hai cặp rưỡi
Phát hiện huyết thanh viêm gan C Anti-HAV-IgG, anti-HCV-IgM
Huyết thanh phát hiện viêm gan D Anti-HDV-IgG, anti-HDV-IgM
Phát hiện huyết thanh học viêm gan E Anti-HEV-IgG
Phát hiện kháng thể chống sốt xuất huyết với hội chứng thận HFRS-IgG
Phát hiện kháng thể kháng vi rút viêm não Nhật Bản IgM
Phát hiện kháng thể vi rút suy giảm miễn dịch ở người (ví dụ, AIDS khu vực) HIV β 2 M
Kiểm tra chức năng chăm sóc trước sinh và sau khi sinh Xét nghiệm vi rút Toxoplasma TOXO
Phát hiện vi rút rubella RV
CMV phát hiện cytomegalovirus
Phát hiện virus herpes simplex Anti-HSV (Ⅰ, Ⅱ)
Những người khác cũng có thể làm xét nghiệm di truyền và dư lượng động vật, các hạng mục kiểm tra dư lượng thuốc trừ sâu, v.v.
